Είναι μια συναρπαστική εξέλιξη, καθώς η μέθοδος επιτρέπει στους καλλιεργητές να προσαρμόσουν ή να τροποποιήσουν τις εφαρμογές μυκητοκτόνων μέσα σε μια ώρα από την ανακάλυψη ύποπτων μολυσμένων μούρων σταφυλιών.
Προηγουμένως η μέθοδος αναπτύχθηκε στο Curtin University για το προσδιορισμό της αντοχής στο ωίδιο σε σιτάρι και στη συνέχεια η μέθοδος προσαρμόστηκε για την ανίχνευση μυκητοκτόνων ανθεκτικών στον botrytis ( Botrytis cinerea ). Το έργο χρηματοδοτείται από το Wine Australia: Διαχείριση αντοχής σε μυκητοκτόνα στην αυστραλιανή αμπελουργία .
Η δοκιμή χρησιμοποιεί μια ποσοτική τεχνική, την αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (qPCR) για να στοχεύσει μια συγκεκριμένη μετάλλαξη που συνδέεται με μυκητοκτόνο αντίσταση στο Botrytis cinerea . Το qPCR είναι μια τεχνική με την οποία μια μετάλλαξη ενδιαφέροντος ενισχύεται σε διαδοχικούς κύκλους και οι ποσότητες DNA μετρώνται σε καθέναν από αυτούς τους κύκλους.
Η μέθοδος με μια ματιά
Η δοκιμή είναι απλή: μεμονωμένα μολυσμένα μούρα λαμβάνονται από τον αμπελώνα και συμπιέζονται με το χέρι για 30 δευτερόλεπτα μέσα σε ένα σωλήνα. Το μείγμα αραιώνεται, προστίθενται αντιδραστήρια και διεξάγεται δοκιμή qPCR για 50 λεπτά σε μια ελαφριά μηχανή qPCR. Το αποτέλεσμα για την κατάσταση αντοχής σε μυκητοκτόνα παρέχεται μέσω λογισμικού ανάλυσης σε φορητό υπολογιστή.
Στη συνέχεια τα αποτελέσματα μπορούν να παρέχουν στους καλλιεργητές τις απαραίτητες πληροφορίες σχετικά με τη συχνότητα αντοχής του AnilinoPyrimidine (AP) σε ένα συγκεκριμένο τμήμα του αμπελώνα. Τα AP είναι πολύ δραστικά μυκητοκτόνα που χρησιμοποιούνται συνήθως σε ένα ευρύ φάσμα μυκήτων.
«Οι καλλιεργητές βρίσκονται με πολύτιμες πληροφορίες στα χέρια τους που μπορούν να τους βοηθήσουν να διατηρήσουν τις πρακτικές διαχείρισης αντίστασης σε καλά επίπεδα και να μειώσουν τον οικονομικό αντίκτυπο της μόλυνσης», εξήγησε ο κύριος ερευνητής, Lincoln Harper από το Curtin University.
«Με τη σειρά τους, οι πληροφορίες συχνότητας αντίστασης μπορούν να βοηθήσουν στην προσαρμογή ή τροποποίηση υπαρχόντων προγραμμάτων εφαρμογής μυκητοκτόνων, εάν είναι απαραίτητο, σε σχέση με τα μυκητοκτόνα AP».
Εάν δεν ανιχνευθεί αντίσταση αλλά υπάρχει αστοχία πεδίου στην εφαρμογή μυκητοκτόνων AP, τότε ίσως χρειαστεί να προσαρμόσετε την εφαρμογή ψεκασμού για να βελτιώσετε την αποτελεσματικότητα.
Η μέθοδος δοκιμάστηκε πρόσφατα επιτυχώς από καλλιεργητές της Δυτικής Αυστραλίας.
«Οι καλλιεργητές έφεραν έναν μικρό αριθμό μολυσμένων τσαμπιών για ανάλυση και κυριολεκτικά έλαβαν αποτελέσματα σχετικά με την κατάσταση αντοχής των μυκητοκτόνων στο botrytis σε περίπου μία ώρα», δήλωσε ο επικεφαλής του έργου, Mark Sosnowski από το Ινστιτούτο Έρευνας και Ανάπτυξης της Νότιας Αυστραλίας (SARDI).
Δήλωσε επίσης ότι η ερευνητική ομάδα είναι ενθουσιασμένη για τη δυνατότητα επέκτασης του τεστ στο μέλλον.
«Το Curtin University έχει ήδη αρχίσει να συνεργάζεται με την ομάδα SARDI για να συμπεριλάβει την ανθεκτικότητα σε ωίδιο σε ορισμένα μυκητοκτόνα. Τελικά, ελπίζουμε να πραγματοποιήσουμε ένα roadshow προς το τέλος του έργου κατά τη σεζόν 2021–22 για να επιδείξουμε αυτήν την τεχνολογία στον τομέα του οίνου ».
Ο επόπτης του έργου Dr. Francisco Lopez Ruiz από το Curtin University είπε ότι η μέθοδος θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί όχι μόνο για τον ποσοτικό προσδιορισμό των μεταλλάξεων, αλλά και για κάθε οργανισμό – υπό την προϋπόθεση ότι υπάρχει αρκετό DNA στο δείγμα.
«Οι ιοί, τα βακτήρια, οι μύκητες, οι ωομύκητες και οι αφίδες είναι όλοι πιθανοί κατάλληλοι στόχοι αυτού του εργαλείου», είπε.
Πηγή: wineaustralia
